廢水處理中的微生物的顯微觀察及測量
發布時間:2020-08-20
廢水處理中的微生物的顯微觀察及測量

廢水處理中原生動物、輪蟲個體很小,大部分容易收縮變形,必須在顯微鏡下仔細觀察其活體的形態特征,才能正確區分不同的種類。

1.微型動物形態的顯微觀察

(1)活體顯微觀察,在生物處理裝置轉運過程中,對活性汙泥和生物膜的生物相,都應隨時予以鏡檢,以觀察其中生物的組成和活動情況,並根據其形態特征,進行種類的鑒定。活體顯微觀察的方法和步驟如下用一小橡皮頭吸管,吸一滴汙泥混合液,放在潔淨的載玻片的中央,然後用鑷子取一潔淨的蓋玻片(方形或圓形),先以一邊靠近水滴並與載玻片接觸,緩慢放平,正好將水滴蓋在蓋玻片下麵。若水太多,可用吸水紙吸去一些,若水太少,可在蓋玻片邊緣再加少許水樣。要防止蓋玻片下麵產生氣泡,影響對生物的觀察。然後將此玻片移到顯微鏡移動台上,先用低倍鏡頭觀察,然後換用高倍鏡頭觀察。由於活體動物不停地運動,可用移動台裝置,移動載玻片,跟蹤觀察。若須仔細觀察輪蟲的咀嚼器,可用一根大頭針在顯微鏡下輕輕壓迫蓋玻片,咀嚼器即可從破碎的蟲體中遊離而出。原生動物口的位置和構造,在分類學上十分重要,必須首先觀察清楚。若認清了口的位置,才能區別蟲體的腹背、左右和前後。原生動物的口一般在腹麵(有些則在側麵或頂端),故凡與口相對的一麵即為蟲體的背麵。以口位於腹麵的蟲體為例,若將口部移到視野的前方,並從腹麵(即有口的一麵)觀察時,則蟲體的左麵正是視野的右方,蟲體的右麵正是視野的左方(輪蟲亦然)。在觀察過程中,切勿首先使用高倍鏡頭。使用低倍鏡時,用粗調節器調整焦距,換用高倍鏡頭後,調整焦距必須用細調節器,以免物鏡碰上玻片和水液,損壞鏡頭。鏡頭(物鏡、目鏡)在使用前後,均須用專門的鏡擦紙輕輕指拭,保持其清潔與幹燥。

(2)活體染色觀察:原生動物是一種單細胞動物,形體小,有些構造須經過染色才能看請。原生動物的細胞核的形狀和部位與種類的區分有一定的關係,這裏僅介紹一種細胞核染色的簡易方法。用百分之一的甲基綠(methyl green)水溶液可將細胞核染成綠色。染色時,係用吸管滴一滴染色劑,沿著蓋玻片邊緣徐徐透入其中,染料即可進入蟲體內部,將細胞核染成深綠色。如染色太深,可在蓋玻片一側加一滴清水,在另一側以吸水紙吸去過多的染液,直至使染色部分清晰為止。此外絲狀菌可用萬分之一的結晶紫染上顏色,容易觀察。

2.微型動物的測量

    在微型動物中,原生動物和輪蟲個體甚小,其大小皆以微米為單位。測量時係用已校準之接目測微尺(簡稱目尺)在顯微鏡下進行計量的。其方法是將一圓形目尺裝入目鏡的中隔上方,使其適與物象在同一平麵上。然後將鏡台測微尺(簡稱台尺)安置在顯微鏡的移動台上,調整焦距,使目尺與台尺的物相清晰可見時,移動台尺(係在一毫米的長度上等分為一百格,每格為10微米),使與目尺之刻線相重合,數出兩重疊線之間各尺的格數,即可求得一格目尺的微米數。如在十倍的目鏡(目尺必須裝入其中)與四十倍的物鏡的條件下,測得兩尺重疊線之間目尺17格適與台尺3格重合,則一格目尺的長度為3(台尺)×10微米/17(目尺)=1.764微米,若蟲體之長等於目尺的30格,則蟲體應為:1.764×30=53微米長。必須注意,在不同放大倍數的條件下測量蟲體的大小,必須在不同的放大倍數下計算目尺的微米數,才可進行測量,切不可以某一放大倍數所測得的目尺微米數代替另一放大倍數去進行測量。

3.微型動物的簡易計數法

    除了活體鏡檢以鑒定微型動物的種類外,還有必要對各種動物的數量及時進行統計,以便分析數量變化與廢水處理的關係。由於活性汙泥中微型動物數量較多,毋須采用沉澱、濃縮的方法,可以直接計數。a股在此介紹的簡易方法隻適用於原生動物和輪蟲。對個體較大的微型動物如寡毛類、線蟲等則須加大計數容量,以免造成誤差。這種簡易方法係用一計數吸管,吸一滴汙泥混合液到載玻片上,進行顯微計數,求出一毫升水樣中的蟲體個數。具體作法如下:

(1)計數吸管每一滴水體積的標定,用一毫升移液吸管,吸一毫升燕溜水(或普通清水)到一清潔的表麵皿(或其他玻璃器皿)中,再用一潔淨的橡皮頭小吸管,從表麵皿中將一毫升水全部吸盡,然後以均勻的速度徐徐滴下,記下一毫升水的滴數(不宜用有半

滴水的吸管作計數管),並重複數次,以免誤差。將計數吸管一滴水中之蟲體數乘以計數吸管一毫升水之滴數,即為每毫升之蟲體數。

(2)顯微計數;將汙泥混合液搖勻後,立即用上述所標定的計數吸管,取一滴放在載玻片上,以蓋玻片(以方形為好)輕輕蓋好水滴(方法如前),放在低倍鏡下計數。先將視野放在蓋玻片的右上角(可根據各人的習慣,也可放在另一角),然後以移動台移動載玻片,視野即可隨之從上而下,從右到左通過。當前一個視野數完,並作好記錄後,再換第二個視野,如此往複將整個蓋玻片下麵的動物全部計數完畢。注意在調換視野時,不可使前後或左右兩個相鄰的視野重疊或遺漏,以免產生誤差。原生動物中有許多種類是群體,須將群體和群體上的個體分別計數。若用20滴為一毫升的計數吸管,取一滴水樣,數得原生動物和輪蟲依次為100個和5個,則換算成每一毫升中的原生動物和輪蟲應有2000(100×20)個和100(5×20)個。

     生物濾池和生物轉盤上的生物膜形成膠狀,且濃度較大,計數方法須在實踐中摸索,不妨先試取一定量的生物膜進行稀釋計數。