熒光顯微鏡使用方法與注意事項
欄目:行業動態 發布時間:2019-09-25
熒光顯微鏡使用方法與注意事項

使用方法:

(1)將物料板放在舞台上。

(2)打開調節器熒光顯微鏡。然後按下啟動一套UV燈不能接近15分鍾內點燃,後收盤不能重新啟動3分鍾。

(3)將激勵濾波器轉換為V,將分色器調整為V,選擇495或475nm阻塞濾波器。

(4)使用uvfl40、uvfl100螢光鏡檢查。

(5)將非熒光油加入到載玻片上,首先使用40X,然後用100X聚焦顯微鏡檢測熒光。

(7)由於在由隨時間推移的UV熒光增加照射熒光物質逐漸減弱,因此應不斷變化的視野檢查。

(8)紫外FL10或紫外FL20也可用作低倍顯微鏡材料(使用低倍顯微鏡時不加熒光油)。

熒光圖像的記錄方法:

熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態特征,具有熒光顏色和亮度。在判斷結果時,必須結合起來作出的判斷。結果是根據主觀指標,即工人的眼睛來記錄的。作為一般的定性觀測,它基本上是的。隨著科技的發展,客觀指標被用來記錄判斷結果,如使用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但是,這些文書所記錄的結果也必須與主觀判斷相結合。

熒光顯微鏡攝影對於記錄熒光圖像是非常必要的。由於熒光容易褪色和減弱,因此有必要對實時照相的結果進行記錄。該方法與普通顯微攝影方法基本相同。隻需使用高速光敏膜,如ASA 200或以上或24。上麵。由於紫外光對熒光的猝滅效應很大,如熒光標記物FITC等,在紫外光照射30s時,熒光亮度下降了50%,因此曝光速度太慢,無法捕捉到熒光圖像。一般研究熒光顯微鏡有半自動或全自動顯微攝影係統.

注意事項:

(1)嚴格按照操作說明書的要求製造的熒光顯微鏡,不改變該程序。

(2)檢查應在暗室進行。進入暗室後,接通電源,點燃超高壓汞燈5-15分鍾。當光源發出強光並穩定下來時,眼睛有效適應暗室,然後開始觀察標本。

(3)為防止紫外線對眼睛造成損害,調節光源時戴防護眼鏡。

(4)每次檢查時間為1~2h,超過90min,超高壓汞燈的發光強度逐漸降低,熒光降低;紫外線照射3~5分鍾後熒光降低。因此,不超過2~3h。

(5)熒光光學顯微鏡是有限的壽命,檢查應聚焦在試樣上,為了節省時間,保護光源。天熱時,冷卻風扇應添加,更換燈泡應該開始新的記錄時間。後燈可以點亮,然後熄滅是,受燈充分冷卻。每日數次,以避免火源。

(6)染色後,熒光會隨著時間逐漸減弱。當試樣在4℃下存放在聚乙烯塑料袋中時,可延遲熒光衰減時間,防止密封劑蒸發。

(7)熒光亮度的確定標準:一般分為四個級別,即"1"-NO或可見弱熒光。"++"-隻能看到明顯可見的熒光。"(+)+"-可見且明亮。